1  适用范围
　　本方法规定了采用液相色谱法测定化妆品中苄索氯铵（121-54-0）、劳拉氯铵（139-07-1）和西他氯铵（122-18-9）的方法。
本方法适用于膏霜类、乳液类和水类化妆品中苄索氯铵、劳拉氯铵和西他氯铵的测定。

2  方法提要
　　样品在经过提取后，经高效液相色谱仪分离，二极管阵列检测器检测，峰面积定量，以标准曲线法计算含量。本方法对苄索氯铵、劳拉氯铵和西他氯铵的检出限、定量下限、检出浓度和最低定量浓度如表1所示。

3  试剂和材料
　　除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为一级实验用水。
3.1  苄索氯铵，纯度≥99%；劳拉氯铵，纯度≥99%；西他氯铵，纯度≥99%。
3.2  甲醇，色谱纯。
3.3  醋酸铵，色谱纯。
3.4  冰醋酸，优级纯。
3.5  标准储备液：取苄索氯铵、劳拉氯铵和西他氯铵各0.05g，精确至0.0001g，置50 mL棕色容量瓶中，用甲醇（3.2）溶解并定容，摇匀，配成质量浓度为1g/L的标准储备溶液。
3.6  标准工作溶液：配制浓度分别为5mg/mL、20mg/mL、30mg/mL、50mg/mL、80mg/mL和100 mg/mL的苄索氯铵、劳拉氯铵和西他氯铵的混合标准工作溶液。

4  仪器
4.1  高效液相色谱仪：具有二极管阵列检测器。
4.2  分析天平：感量0.0001g。
4.3  分析天平：感量0.001g。
4.4  精密pH计：精度0.01。
4.5  涡旋振荡器。
4.6  超声波清洗器。

5  测定步骤
5.1  样品前处理
　　称取样品0.5g，精确至0.001g，置于25mL具塞刻度管中，加入20 mL甲醇（3.2），涡旋振荡1 min，超声（功率：400W）提取15min，取出，冷却至室温后用甲醇（3.2）定容至25mL，混匀，经0.45 mm滤膜过滤，滤液作为待测样液，备用。
5.2  测定
5.2.1  色谱条件
　　色谱柱：CN 柱，250 mm×4.6mm，5 mm；
　　流动相：甲醇+0.1mol/L醋酸铵缓冲溶液（冰醋酸调pH至5.0）（75+25）；
　　流速：1.0 mL/min；
　　检测波长：260nm；
　　柱温：25℃；
　　进样量：20mL。
5.2.2  测定方法
　　取标准工作溶液分别进样，以目标峰面积为纵坐标，标准溶液浓度为横坐标进行线性回归，建立三条标准工作曲线。取“5.1”项下处理得到的待测溶液进样，根据测定成分的峰面积，分别代入三条标准工作曲线上，得出苄索氯铵、劳拉氯铵和西他氯铵的质量浓度。按“6计算”，计算样品中苄索氯铵、劳拉氯铵和西他氯铵的含量。
5.3  平行实验
　　按以上步骤操作，对同一样品独立进行测定获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。

　　6  计算

式中：
　　w ——化妆品中苄索氯铵、劳拉氯铵和西他氯铵的质量分数，%；
　　m —— 样品取样量，g；
　　ρ—— 从标准工作曲线上查得的待测样液中苄索氯铵、劳拉氯铵和西他氯铵的质量浓度，mg/mL；